O teste do tipo de inativação microbiana é uma qualificação crítica de desempenho para esterilizadores de óxido de etileno, especialmente para equipamentos Classe B. Este método de meio ciclo utiliza dispositivos de desafio de processo (PCDs) e indicadores biológicos para verificar se o esterilizador pode atingir um nível de garantia de esterilidade (SAL) de 10⁻⁶ nas piores condições. O procedimento descrito aqui está alinhado com os requisitos de validação para esterilizadores industriais ETO projetado para processamento de dispositivos médicos.

Equipamentos e materiais necessários

Os seguintes itens são necessários para realizar o teste de tipo corretamente:

• Dispositivos de Desafio de Processo (PCDs): Quatro unidades idênticas. Cada PCD consiste em um tubo de aço inoxidável e uma câmara semifechada que contém o indicador biológico. A tampa ou abertura da câmara usa um anel de vedação e conexão roscada para garantir que o único caminho do gás seja através do comprimento do tubo. O tubo tem um comprimento nominal de 4.55 eu, um diâmetro interno de 3.0 milímetros (relação comprimento/diâmetro 1500:1), proporcionando um volume interno total de aproximadamente 32 mL, cujo volume da câmara é 0.85 mL.
• Bolsas: Oito bolsas de papel-plástico em conformidade com GB/T 19633.1, GB/T 19633.2, AA/T 0698.4, e AA/T 0698.5.
• Indicadores Biológicos: Tiras de esporos ou indicadores independentes em conformidade com GB 18281.1 e GB 18281.2, tipicamente Bacillus atrophaeus esporos para esterilização por EO.
• Meio de recuperação: Meio de crescimento apropriado especificado pelo fabricante do indicador biológico.
• Incubadora: Calibrado para a temperatura necessária para o indicador biológico.

Procedimento de teste (Método de meio ciclo)

Siga estas etapas sistematicamente. Todos os indicadores biológicos devem ser do mesmo lote, e um controle positivo deve ser incluído em cada teste.

Etapa 1 – Preparação de PCDs

Coloque um indicador biológico dentro da câmara de teste de cada dispositivo de desafio de processo. Embrulhe duas vezes cada PCD em duas bolsas de papel-plástico, selando cada bolsa individualmente com um selador térmico. O invólucro duplo aumenta o desafio de penetração do esterilizante.

Etapa 2 – Condicionamento

Não é necessário pré-condicionamento dos PCDs. No entanto, eles devem ser mantidos a 20°C ±5°C por pelo menos uma hora antes do teste. Isso simula a pior condição de partida a frio, tornando mais difícil para o esterilizante alcançar os esporos.

Etapa 3 – Carregamento e Iniciação do Ciclo

Pré-aqueça o esterilizador à temperatura normal de esterilização. Carregue todos os quatro PCDs embalados na câmara e inicie o ciclo de teste dentro 15 minutos de carregamento. O tempo de exposição ao esterilizante deve ser definido para metade do tempo nominal de exposição do ciclo de esterilização em teste. Todos os outros parâmetros do ciclo (temperatura, umidade, pressão) permanecem inalterados.

Etapa 4 – Manuseio pós-ciclo

Depois que o ciclo terminar, remova os PCDs do esterilizador. Extraia assepticamente os indicadores biológicos das câmaras de PCD e transfira-os para o meio de recuperação. Incubar de acordo com as instruções do fabricante, juntamente com um controle positivo não esterilizado do mesmo lote.

Etapa 5 – Interpretação

Se o controle positivo mostrar crescimento viável, o teste é válido. Todos os indicadores biológicos da exposição de meio ciclo não devem mostrar crescimento. Se algum indicador de teste mostrar crescimento, o teste falha, indicando letalidade insuficiente. Repita o procedimento completo mais duas vezes (três corridas no total). A inativação consistente em todas as três execuções confirma a capacidade de desempenho microbiano do esterilizador.

Aplicabilidade e Limitações

Este tipo de teste é obrigatório para esterilizadores Classe B, mas também pode ser aplicado a esterilizadores Classe A com programas pré-definidos. No entanto, para equipamentos Classe A, o teste de tipo não substitui uma qualificação de desempenho completa (QP) sob condições reais de carga. Consulte sempre o plano mestre de validação do fabricante e os padrões regulatórios relevantes ao implementar este protocolo.