Thử nghiệm loại bất hoạt vi sinh vật là một đánh giá hiệu suất quan trọng đối với máy tiệt trùng oxit ethylene, đặc biệt đối với thiết bị loại B. Phương pháp nửa chu kỳ này sử dụng các thiết bị thử thách quy trình (PCD) và các chỉ số sinh học để xác minh rằng máy tiệt trùng có thể đạt được mức đảm bảo vô trùng (SAL) của 10⁻⁶ trong điều kiện trường hợp xấu nhất. Quy trình được mô tả ở đây phù hợp với các yêu cầu xác nhận đối với máy tiệt trùng ETO công nghiệp được thiết kế để xử lý thiết bị y tế.

Thiết bị và vật liệu cần thiết

Các mục sau đây là cần thiết để thực hiện kiểm tra loại một cách chính xác:

• Thiết bị thử thách quy trình (PCD): Bốn đơn vị giống hệt nhau. Mỗi PCD bao gồm một ống thép không gỉ và một buồng nửa kín để chứa ống chỉ thị sinh học.. Nắp buồng hoặc lỗ mở sử dụng vòng đệm chữ O và kết nối bằng ren để đảm bảo đường dẫn khí duy nhất đi qua chiều dài ống. Ống có chiều dài danh nghĩa là 4.55 tôi, đường kính bên trong của 3.0 mm (tỷ lệ chiều dài và đường kính 1500:1), cho tổng thể tích bên trong xấp xỉ 32 mL, trong đó thể tích buồng là 0.85 mL.
• Túi: Tám túi giấy-nhựa phù hợp với GB/T 19633.1, GB/T 19633.2, YY/T 0698.4, và YY/T 0698.5.
• Chỉ số sinh học: Dải bào tử hoặc chất chỉ thị độc lập tuân thủ GB 18281.1 và GB 18281.2, tiêu biểu Bacillus atrophaeus bào tử để khử trùng EO.
• Phương tiện phục hồi: Môi trường tăng trưởng thích hợp do nhà sản xuất chỉ thị sinh học chỉ định.
• Vườn ươm: Hiệu chuẩn theo nhiệt độ yêu cầu cho chỉ thị sinh học.

Quy trình kiểm tra (Phương pháp nửa chu kỳ)

Thực hiện theo các bước sau một cách có hệ thống. Tất cả các chỉ thị sinh học phải từ cùng một lô, và phải có đối chứng dương tính trong mỗi lần chạy thử.

Bước chân 1 – Chuẩn bị PCD

Đặt một ống chỉ thị sinh học bên trong buồng thử nghiệm của mỗi thiết bị thử thách quy trình. Bọc đôi từng PCD trong hai túi giấy nhựa, niêm phong từng túi riêng lẻ bằng máy hàn nhiệt. Lớp bọc kép làm tăng thách thức cho chất khử trùng xâm nhập.

Bước chân 2 – Điều hòa

Không cần điều chỉnh trước PCD. Tuy nhiên, chúng phải được giữ ở nhiệt độ 20°C ±5°C trong ít nhất một giờ trước khi thử nghiệm. Điều này mô phỏng điều kiện khởi động nguội trong trường hợp xấu nhất, làm cho chất khử trùng khó tiếp cận bào tử hơn.

Bước chân 3 – Tải và bắt đầu chu kỳ

Làm nóng máy tiệt trùng trước ở nhiệt độ tiệt trùng bình thường. Tải tất cả bốn PCD được bọc vào buồng và bắt đầu chu trình thử nghiệm trong vòng 15 phút tải. Thời gian tiếp xúc với chất khử trùng phải được đặt thành một nửa thời gian phơi nhiễm danh nghĩa của chu trình khử trùng được thử nghiệm. Tất cả các thông số chu kỳ khác (nhiệt độ, độ ẩm, áp lực ) vẫn không thay đổi.

Bước chân 4 – Xử lý sau chu kỳ

Sau khi chu kỳ kết thúc, lấy PCD ra khỏi máy tiệt trùng. Chiết xuất vô trùng các ống chỉ thị sinh học từ buồng PCD và chuyển chúng vào môi trường thu hồi. Ủ theo hướng dẫn của nhà sản xuất, cùng với mẫu đối chứng dương tính không tiệt trùng từ cùng một lô.

Bước chân 5 – Phiên dịch

Nếu đối chứng dương cho thấy sự tăng trưởng khả thi, bài kiểm tra có hiệu lực. Tất cả các chỉ số sinh học từ phơi nhiễm nửa chu kỳ phải không có sự tăng trưởng. Nếu bất kỳ chỉ số kiểm tra nào cho thấy sự tăng trưởng, bài kiểm tra thất bại, cho thấy không đủ sát thương. Lặp lại quy trình hoàn chỉnh hai lần nữa (tổng cộng ba lần chạy). Việc ngừng hoạt động nhất quán trong cả ba lần chạy xác nhận khả năng hoạt động của vi sinh vật của máy tiệt trùng.

Khả năng áp dụng và hạn chế

Thử nghiệm loại này là bắt buộc đối với máy tiệt trùng Loại B nhưng cũng có thể áp dụng cho máy tiệt trùng Loại A có chương trình cài đặt sẵn. Tuy nhiên, cho thiết bị loại A, bài kiểm tra điển hình không thay thế việc đánh giá năng lực đầy đủ (PQ) trong điều kiện tải thực tế. Luôn tham khảo kế hoạch tổng thể xác nhận của nhà sản xuất và các tiêu chuẩn quy định liên quan khi triển khai quy trình này.