Uji jenis inaktivasi mikroba merupakan kualifikasi kinerja penting untuk alat sterilisasi etilen oksida, khususnya untuk peralatan Kelas B. Metode setengah siklus ini menggunakan perangkat tantangan proses (PCD) dan indikator biologis untuk memverifikasi bahwa alat sterilisasi dapat mencapai tingkat jaminan sterilitas (SAL) sebesar 10⁻⁶ dalam kondisi terburuk. Prosedur yang dijelaskan di sini selaras dengan persyaratan validasi alat sterilisasi ETO industri dirancang untuk pemrosesan perangkat medis.

Peralatan dan Bahan yang Dibutuhkan

Item berikut diperlukan untuk melakukan tes tipe dengan benar:

• Perangkat Tantangan Proses (PCD): Empat unit identik. Setiap PCD terdiri dari tabung baja tahan karat dan ruang semi-tertutup yang menampung indikator biologis. Tutup atau bukaan ruang menggunakan segel O-ring dan sambungan berulir untuk memastikan satu-satunya jalur gas melalui panjang tabung. Tabung tersebut mempunyai panjang nominal 4.55 M, diameter dalam sebesar 3.0 mm (rasio panjang terhadap diameter 1500:1), memberikan total volume internal sekitar 32 mL, dimana volume ruangannya adalah 0.85 mL.
• kantong: Delapan kantong kertas‑plastik yang sesuai dengan GB/T 19633.1, GB/T 19633.2, YY/T 0698.4, dan YY/T 0698.5.
• Indikator Biologis: Strip spora atau indikator mandiri yang mematuhi GB 18281.1 dan GB 18281.2, khas Bacillus atrophaeus spora untuk sterilisasi EO.
• Media Pemulihan: Media pertumbuhan yang sesuai ditentukan oleh produsen indikator biologis.
• Inkubator: Dikalibrasi dengan suhu yang diperlukan untuk indikator biologis.

Prosedur Tes (Metode Setengah Siklus)

Ikuti langkah-langkah ini secara sistematis. Semua indikator biologis harus berasal dari batch yang sama, dan kontrol positif harus disertakan dalam setiap uji coba.

Melangkah 1 – Persiapan PCD

Tempatkan satu indikator biologis di dalam ruang uji pada setiap perangkat tantangan proses. Bungkus dua kali setiap PCD dalam dua kantong kertas‑plastik, menyegel setiap kantong satu per satu dengan penyegel panas. Pembungkusan ganda meningkatkan tantangan bagi zat steril untuk melakukan penetrasi.

Melangkah 2 – Pengkondisian

Tidak diperlukan pengkondisian awal PCD. Namun, suhunya harus dijaga pada suhu 20°C ±5°C setidaknya satu jam sebelum pengujian. Ini menyimulasikan kondisi start dingin terburuk, sehingga lebih sulit bagi alat sterilisasi untuk mencapai spora.

Melangkah 3 – Inisiasi Pemuatan dan Siklus

Panaskan alat sterilisasi ke suhu sterilisasi normal. Masukkan keempat PCD yang dibungkus ke dalam ruangan dan mulai siklus pengujian di dalamnya 15 menit pemuatan. Waktu paparan sterilan harus diatur ke setengah dari waktu pemaparan nominal dari siklus sterilisasi yang diuji. Semua parameter siklus lainnya (suhu, kelembaban, tekanan) tetap tidak berubah.

Melangkah 4 – Penanganan Pasca Siklus

Setelah siklus berakhir, keluarkan PCD dari alat sterilisasi. Ekstrak indikator biologis dari ruang PCD secara aseptik dan pindahkan ke media pemulihan. Inkubasi sesuai dengan instruksi pabriknya, bersama dengan kontrol positif yang tidak disterilkan dari batch yang sama.

Melangkah 5 – Interpretasi

Jika kontrol positif menunjukkan pertumbuhan yang layak, tes tersebut valid. Semua indikator biologis dari paparan setengah siklus tidak boleh menunjukkan pertumbuhan. Jika ada indikator pengujian menunjukkan pertumbuhan, tesnya gagal, menunjukkan tingkat kematian yang tidak mencukupi. Ulangi prosedur lengkap dua kali lagi (total tiga putaran). Inaktivasi yang konsisten pada ketiga proses tersebut menegaskan kemampuan kinerja mikroba alat sterilisasi.

Penerapan dan Keterbatasan

Uji jenis ini wajib untuk alat sterilisasi Kelas B namun juga dapat diterapkan pada alat sterilisasi Kelas A dengan program yang telah ditentukan sebelumnya. Namun, untuk peralatan Kelas A, tes tipe tidak menggantikan kualifikasi kinerja penuh (PQ) dalam kondisi beban sebenarnya. Selalu mengacu pada rencana induk validasi pabrikan dan standar peraturan yang relevan saat menerapkan protokol ini.